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兔子E選擇素ELISA試劑盒

簡(jiǎn)要描述:

兔子E選擇素 E-Selectin/CD62E ELISA試劑盒 Rabbit E-Selectin ELISA試劑盒

更新時(shí)間:2024-08-17;廠商性質(zhì):經(jīng)銷商;覽量:850

兔子E選擇素ELISA試劑盒

 1.間接ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒) 本法主要用于檢測(cè)抗體。以鴨病毒性肝炎(DVH)抗體的ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)為例,間接ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)的操作程序如下。  ?。?) 材料  ?、?包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液;  ?、?DVH包被抗原、酶標(biāo)抗抗體、陰性及陽(yáng)性DVH參考血清;待檢鴨血清;  ?、?ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。  ?。?) 方法步驟  ?、?加抗原包被 → 4℃過(guò)夜,洗滌三次、拋干   ② 加待檢血清 → 37℃ 2小時(shí),洗滌三次、拋干  ?、?加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 2小時(shí),洗滌三次、拋干  ?、?加底物液 → 37℃ 30分鐘,加終止液   ⑤ 用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀測(cè)定OD值,并計(jì)算出P/N比值。  ?。?) 結(jié)果判定 已知陽(yáng)性血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1,而且已知陽(yáng)性血清的OD值≥0.4;在上述條件成立的情況下,如果待檢血清與已知陰性血清的比值(P/N)≥2.1,而且待檢血清的OD值≥0.4,則判為陽(yáng)性,否則判為陰性。   2.雙抗體夾心ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒) 本法主要用于檢測(cè)大分子抗原。現(xiàn)以檢測(cè)雞傳染性法氏囊病病毒(IBDV)的雙夾心抗體ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)為例介紹本法的操作程序。   ① 加抗體包被 → 4℃過(guò)夜,洗滌三次、拋干  ?、?加待檢抗原 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干  ?、?加酶標(biāo)抗體 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干  ?、?加底物液 → 37℃ 15分鐘,加終止液   ⑤ 用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀測(cè)定OD值。

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 被結(jié)合的酶標(biāo)抗原的量由酶催化底物反應(yīng)產(chǎn)生有色產(chǎn)物的量來(lái)確定,如果待檢溶液中抗原越多,被結(jié)合的標(biāo)記抗原的量就越少,有色產(chǎn)物就減少,這樣根據(jù)有色產(chǎn)物的變化就可求出未知抗原的量。此法的優(yōu)點(diǎn)在于快速、特異性高、且可用于小分子抗原及半抗原的檢測(cè);其主要不足在于每種抗原都要進(jìn)行酶標(biāo)記,而且因?yàn)榭乖慕Y(jié)構(gòu)不同,還需應(yīng)用不同的結(jié)合方法。此外,試驗(yàn)中應(yīng)用酶標(biāo)抗原的量較多。5.阻斷ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒) 本法主要用于檢測(cè)型特異性抗體。該方法現(xiàn)已成為豬傳染性胃腸炎(TGE)、豬偽狂犬病(PR)及豬胸膜肺炎(AP)的主要檢測(cè)方法。下面以AP2型抗體的阻斷ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)法為例介紹其操作程序:   ① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過(guò)夜,洗滌三次、拋干   ② 用200μl阻斷緩沖液進(jìn)行封閉 → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干  ?、?加工作量1:4稀釋被檢豬血清100μl → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干  ?、?加100μl工作量兔抗AP2型血清 → 37℃ 30分鐘,洗滌三次、拋干  ?、?加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干   ⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘,加終止液  ?、?用ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫試劑盒)檢測(cè)儀測(cè)定OD值。   本試驗(yàn)同時(shí)設(shè)標(biāo)準(zhǔn)陰、陽(yáng)性血清對(duì)照、兔抗AP2型陽(yáng)性對(duì)照、空白對(duì)照。  

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